Приготування основного розчину очищених ферментних препаратів

0, 1000-1, 000 г дослідного препарату (в залежності від передбачуваної активності) розчиняють в невеликій кількості води, при необхідності старанно розтираючи скляною паличкою, кількісно переносять в мірну колбу місткістю 100 см³, доводять дистильованою водою до мітки і перемішують. Препарати з нерозчинними наповнювачами фільтрують. Розчин зберігають протягом доби при температурі від 2 до 6°С.

 

Приготування робочого розчину очищених

Ферментних препаратів

Робочий розчин готують у відповідності до таблиці 1 із основного розчину (для наважки 0, 1000 г), розбавляючи його дистильованою водою таким чином, щоб в 5 см³ робочого розчину містилась маса ферменту, яка забезпечувала б в прийнятих умовах гідроліз крохмалю від 20 до 60 %.

 

Таблиця 1.

Амілолітична активність (АС), од./Г (передбачувана)	Маса препарату в 5 см3 робочого розчину (m1), мг	Об’єм основного розчину, необхідний для вторинного розбавлення, см3	Загальний об’єм розбавленого розчину, см3
Від 20 до 80 включно	5, 0	50, 0	50, 0
Від 80 до 150 включно	2, 0	20, 0	50, 0
Від 150 до 300 включно	1, 0	10, 0	50, 0
Від 300 до 700 включно	0, 5	5, 0	50, 0
Від 700 до 1200 включно	0, 25	10, 0	200, 0
Від 1200 до 2500 включно	0, 125	5, 0	200, 0
Від 2500 до 5000 включно	0, 05	2, 0	200, 0
Вище 5000	0, 025	1, 0	200, 0

 

Робочий розчин ферментного препарату готують безпосередньо перед визначанням.

Приготування основного розчину із повітряно-сухої

Культури гриба

5, 00 г досліджуваної повітряно-сухої культури гриба, попередньо розтертої в ступці, переносять в конічну колбу місткістю 250 см³, додають 90 см³ дистильованої води і 10 см³ ацетатного буферного розчину з рН 4, 7. Суміш витримують протягом 1 год в термостаті при температурі (30, 0±0, 2)º С, періодично перемішуючи і потім фільтрують. Фільтрат використовують в якості основного розчину.

Фільтрат зберігають протягом доби при температурі від 2 до 6º С.

 

Приготування робочого розчину із повітряно-сухої

Культури гриба

Робочий розчин готують із основного розчину, розбавляючи його дистильованою водою, у відповідності до таблиці 2.

 

Таблиця 2.

Амілолітична активність (АС), культури гриба од./Г., (передбачувана)	Маса культури гриба в 5 см3 робочого розчину (m1), мг	Об’єм основного розчину, необхідний для вторинного розбавлення, см3	Загальний об’єм розбавленого розчину, см3
Від 5 до 15 включно	37, 5
Від 15 до 50 включно	10, 0
Від 50 до 100 включно	2, 5
Від 100 до 150 включно	1, 25
Від 150 до 300 включно	0, 625	0, 5

 

Приготування основного розчину із культурної рідини бактеріального походження

В мірну колбу місткістю 100 см³ наливають 90 см³ дистильованої води і вносять 1 см³ досліджуваної культури рідини. Об’єм доводять до мітки дистильованою водою.