Процедура иммобилизации состоит в смешивании в определенных ус-Ловиях фермента с носителем и инкубации смеси. Затем при помощи Фильтрования и центрифугирования проводят отделение нерастворимого Компонента смеси от растворимого. В процессе адсорбции фермента на Носителе при их взаимодействии возникают солевые связи, а также другие слабые взаимодействия (водородные, ван-дер-ваальсовы). Адсорбция – Мягкий метод иммобилизации, при котором влияние носителя на актив- Ность фермента минимально, поэтому, как правило, ферменты хорошо сохраняют активность. Недостаток данного метода – непрочность связей. Поэтому при незначительном изменении условий среды (рН, температу- Ры, ионной силы, концентрации продукта) возможна десорбция фермента С поверхности носителя. Более прочными являются связи, основанные на Ионном взаимодействии, когда адсорбция поддерживается при определен- Ных значениях рН и ионной силе омывающего фермент раствора. Методы химического связывания имеют долгую историю и реализу- Ются в различных модификациях. Практически все функциональные Группы белков могут быть использованы для связывания катализатора с Носителем. Широкое применение нашли реакции, ведущие в присутствии Водоотнимающего агента к образованию пептидных связей между амино-
|
