Ход работы. 1. Растворимость жиров. В 7 пробирок поместить по 1 - 2 капли подсолнечного масла, после чего прибавить в них последовательно по 2 - 3 мл растворителя: в1. Растворимость жиров. В 7 пробирок поместить по 1 - 2 капли подсолнечного масла, после чего прибавить в них последовательно по 2 - 3 мл растворителя: в первую - дистиллированную воду, во вторую - петролейный эфир, в третью - бензин, в четвертую - хлороформ, в пятую - четыреххлористый углерод, в шестую и седьмую - спирт. Взбалтыванием хорошо перемешать содержимое каждой пробирки, седьмую нагреть. Записать, какие из испытанных веществ являются растворителями жиров.
2. Эмульгирование жиров. Жиры при взбалтывании с водой образуют эмульсию, представляющую собой дисперсную систему, в которой мелкие капли жира взвешены в воде. Эмульсия масла в воде неустойчива, в спокойном состоянии наступает быстрое расслаивание, мелкие капли жира в процессе столкновения друг с другом соединяются в более крупные, переходящие далее в слой масла на поверхности воды. Чтобы придать стойкость эмульсии в воде. Необходимо введение ряда веществ, способных в результате адсорбции на поверхности шарика эмульгированного вещества уменьшить поверхностное натяжение масла, в результате чего происходит снижение поверхностной энергии и эмульсия приобретает устойчивость. Вещества, снижающие поверхностную энергию, называются эмульгаторами. Склонность некоторых веществ к образованию эмульсий важна как в биологическом, так и народнохозяйственном отношении. К числу природных эмульсий относятся молоко, лимфа, латекс (каучуки). Вещества, находящиеся в организмах животных и растений, свободно перемещаются совместно с током жидкости. Жиры, находящиеся в кишечнике в виде эмульсий, характеризуются большой поверхностью, способствующей более энергичному воздействию на них ферментов. Взять в 5 пробирок по равному количеству подсолнечного масла (4 - 5 капель), прилить в первую из них 5 мл дистиллированной воды, а в остальные прилить по 5 мл: во вторую - 5%-ный раствор КОН, в третью - 5%-ный раствор соды, в четвертую - раствор мыла, в пятую - раствор белка. Содержимое пробирок сильно встряхнуть и наблюдать степень стойкости возникших эмульсий во взятых пробирках. Расположить пробирки в порядке возрастания стойкости полученных эмульсий.
3. Омыление жиров. Жиры в присутствии щелочи подвергаются гидролизу, при этом образуется мыло и глицерин:
В широкую пробирку с 0, 5 - 1 г масла прилить 5 мл спиртового раствора КОН. Содержимое перемешать, закрыть пробирку пробкой, в которую вставлен воздушный холодильник, и нагревать в течение 30 мин. После гидролиза содержимое пробирки перелить в фарфоровую чашку, прибавить 10 мл дистиллированной воды и осторожно нагреть для удаления спирта. Из полученного раствора калийного мыла половину отлить в пробирку.
4. Реакции свободных жирных кислот. Оставшийся в фарфоровой чашке раствор мыла подкислить концентрированной соляной кислотой, происходит выделение свободных жирных кислот: RCOOK + HCl ® RCOOH + KCl. Осадок отфильтровать, отмыть от кислоты так, чтобы промывание не давало кислой реакции на лакмус. Взять часть жирных кислот в пробирку, растворить в нейтральном эфире, прилить к спирту, содержащему каплю раствора соды и 2 капли фенолфталеина. Жирные кислоты нейтрализуют раствор соды, благодаря чему исчезает малиновая окраска.
С отлитым ранее в пробирку раствором калийного мыла проделать следующие реакции: - Образование нерастворимых кальциевых солей: в пробирку с 2 - 3 каплями калийного мыла (ранее отлитого в пробирку из фарфоровой чашки) прилить 5%-ный раствор хлорида кальция, образуются нерастворимые в воде кальциевые мыла жирных кислот. - Высаливание мыла: в другую пробирку с 2 - 3 мл раствора мыла прибавить порошок хлористого натрия, происходит осаждение - высаливание мыла. - Образование свинцового пластыря: в третью пробирку с 3 мл раствора мыла прилить несколько капель 10%-ного раствора ацетата свинца. Образуется осадок, который при нагревании делается вязким (свинцовый пластырь). Напишите уравнения реакций, в которые вступают калиевые соли жирных кислот.
5. Акролеиновая реакция. Эта реакция используется с целью доказательства наличия в жирах глицерина, который при нагревании разлагается с образованием акролеина (акрилового альдегида). Взять в пробирку 2 - 3 капли масла, прибавить кристаллик бисульфата калия и нагреть, при этом образуется акролеин в виде белого пара с характерным резким запахом горелого сала.
6. Реакция на лецитин. Выделение лецитина из яичного желтка: взять в сухую пробирку шестую часть вареного яичного желтка и прилить к нему 5 мл кипящего этанола. Смесь тщательно перемешивать стеклянной палочкой в течение 5 – 10 мин, а затем профильтровать в сухую пробирку. Фильтрование повторить, если фильтрат окажется мутным. Спиртовой раствор лецитина разделить на 4 части и проделать следующие реакции: 1) Осаждение лецитина ацетоном: налить в пробирку 2 - 3 мл ацетона и прилить 5 капель спиртового раствора лецитина. Последний нерастворим в ацетоне, поэтому образуется муть. 2) Осаждение лецитина хлоридом кадмия: взять в сухую пробирку 4 - 5 капель спиртового раствора лецитина и прибавить 2 - 3 капли насыщенного спиртового раствора хлорида кадмия. Образуется нерастворимое соединение кадмия с лецитином. 3) Получение эмульсии лецитина: взять в сухую пробирку 5 капель спиртового раствора лецитина и прилить 25 - 30 капель дистиллированной воды. Возникает стойкая эмульсия лецитина. 4) Гидролиз лецитина: к нескольким каплям спиртового раствора лецитина добавить равный объем 10%-ного раствора гидроксида натрия, кипятить 3 минуты. В результате лецитин распадается на составные части: глицерин, высшие жирные кислоты, фосфорную кислоту и холин. Холин превращается в триметиламин, который обнаруживается по запаху селедочного рассола. Напишите уравнение реакции гидролиза лецитина.
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.............................................................................................. 3 СЛОВАРЬ ТЕРМИНОВ.......................................................................... 4 СПРАВОЧНЫЕ МАТЕРИАЛЫ.............................................................. 9 1. Аминокислоты..................................................................................... 9 2. Нуклеиновые кислоты....................................................................... 12 3. Ферменты........................................................................................... 14 4. Углеводы............................................................................................ 19 5. Липиды............................................................................................... 22 6. Катаболизм нуклеиновых кислот...................................................... 30 7. Катаболизм белков............................................................................ 35 8. Код белкового синтеза....................................................................... 38 9. Катаболизм углеводов....................................................................... 39 10. Дыхание............................................................................................ 40 11. Биоэнергетика.................................................................................. 42 МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЛАБОРАТОРНЫМ РАБОТАМ.. 43 Работа 1. Распределительная хроматография аминокислот на бумаге 43 Работа 2.Определение изоэлектрической точки белков...................... 44 Работа 3. Качественные реакции на белки........................................... 46 Работа 4. Выделение рибонуклеопротеинов из дрожжей и качественное определение продуктов их гидролиза (белка, рибозы, пуриновых оснований и фосфорной кислоты)................................................................................................. 52 Работа 5. Качественные реакции на присутствие ферментов.............. 54 Работа 6. Свойства ферментов.............................................................. 56 Работа 7. Качественные реакции на углеводы..................................... 60 Работа 8. Характерные реакции на липиды......................................... 63
|
