Определена константа Михаэлиса 0,02±0,01моль/л и максимальная скорость 0,0050±0,0025мкмоль/(мл·мин).График Эйзеншталя-Корниш-Боудена Определение константы Михаэлиса графическим методом Эйзеншталя-Корниш-Боудена (см. Приложение, график 3). Способ получения графика описан в теоретической части. Из графика видно, что идеального совпадения с теорией нет, так как наблюдается “плавающая точка” пересечения графиков. Такое явление довольно обычно для подобных экспериментов. Причина, наверное, состоит в погрешностях приборов. Из графика 3 видно, что уменьшение концентрации субстрата приводит к увеличению точности нанесения точек по оси ординат в ущерб точности нанесения точек по оси абсцисс. Мы не можем брать очень близкие между собой концентрации субстрата, так как иначе из экспериментального графика (см. Приложение) в силу случайных или систематических ошибок невозможно с хорошей точностью рассчитать начальную скорость.
Таблица 3
Из графика 3 находим, что константа Михаэлиса находится в пределах 0,0015±0,005моль/л, что совпадает с результатом, полученным методом двойных обратных координат Лайнуивера-Берка. Максимальная скорость реакции определена как 0,0056±0,0003 мкмоль/(мл·мин). График Иди-Хофсти Таблица 4
Построенный по экспериментальным данным график был приближен прямой по методу наименьших квадратов. Было получено уравнение прямой в координатах (W, W/[S]), что позволило определить константу Михаэлиса как –tg угла наклона прямой графика с положительным направлением оси абсцисс. Фактически константа Михаэлиса – коэффициент пропорциональности в уравнении прямой. Получено среднее значение 0,030±0,007 моль/л. .
|
