Проба с амидопирином

Принцип метода

Гемоглобин катализирует реакцию окисления амидопирина перекисью водорода. Продукт реакции имеет фиолетовую окраску.

Реактивы

1.5% раствор амидопирина: 2,5 г амидопирина вносят в мерную колбу на 50 мл. Приливают до метки 96 % этиловый спирт. 2. 3 % раствор перекиси водорода.

Ход определения

В пробирку вносят 2-3 мл мочи, прибавляют 8-10 капель раствора перекиси водорода. При наличии гемоглобина в моче развивается фиолетовое окрашива­ние.

Примечание. Для исключения получения ложноположительных результатов на гемоглобин за счет возможного присутствия в моче миоглобина, йодистого и бромистого калия, попадания в мочу солей тяжелых металлов (желез: медь) можно приготовить уксусно-эфирную вытяжку гемоглобина мочи, с которой и проводятся дальнейшие исследования. Для этого к 8-10 каплям мочи приливают 2 мл ледяной уксусной кислоты и 4-5 мл диэтилового эфира. Содержимое пробирки встряхивают. После расслаивания жидкостей отделяют верхний слой уксусно-эфирной вытяжки, в которую перешел гемоглобин.

Диагностическая информация

Гемоглобин в моче может быть обнаружен во всех случаях развития гемату­рии. Истинная гемоглобинурия (наличие свободного гемоглобина в моче) может возникнуть вследствие массивной гибели эритроцитов в кровеносном русле внутрисосудистый гемолиз), сопровождающейся полным насыщением системы гаптоглобина, что обусловливает развитие гемоглобинемии. Экскреция гемогло­бина с мочой наступает при его концентрации в плазме 1,25 г/л. Профильтровав­шись в клубочках, свободный гемоглобин реабсорбируется, максимальная реабсорбционная способность канальцев почки составляет около 1,3 мг/мин.

Внутрисосудистый гемолиз может возникать при следующих патологичес­ких состояниях: инфаркт почки, пароксизмальная холодовая гемоглобинурия, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, трансфузионные реакции после пере­ливания несовместимой крови, обширные ожоги, прямая или внутрисосудистая травматизация эритроцитов (физическая нагрузка, протезирование клапанов сердца, некротизирующий артериолит); микроангиопатическая гемолитическая анемия (гемолитикоуремический синдром, тромботическая тромбоцитопеническая пурпура, диссеминированное внутрисосудистое свертывание, некроз коры почки); инфекции (малярия, газовая гангрена, сыпной тиф, антракоз, желтая лихорадка); наследственная предрасположенность к гемолизу (дефицит глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, пируваткиназы, серповидно-клеточная анемия и др.); отравления анилином, бертолетовой солью, уксусной кислотой, карболовой кислотой, ядовитыми грибами; лекарственные средства (ацетанилид, ацетилса­лициловая кислота, йодоформ, сульфаниламиды, хинин, фенацетин); укусы ядо­витых змей.