ТЕМЫ ДЛЯ РЕФЕРАТИВНЫХ СООБЩЕНИЙ. 1. Атеросклероз, причины, патогенез, последствия

1. Атеросклероз, причины, патогенез, последствия. Современные подходы к лечению атеросклероза.

2. Метаболический синдром (синдром Х). Его связь с ожирением, атеросклерозом, сахарным диабетом II типа, гипертензией. Причины. Основы лечения.

3. Болезни накопления липидов: Нимана-Пика, Тея-Сакса, Гоше, Шюллера-Кристиана, Вольмана. Молекулярные причины, патогенез. Основы лечения.

Лабораторная работа 1

Определение концентрации холестерола
в сыворотке крови

Принцип

Метод основан на использовании сопряженных ферментативных реакций. Холестеролэстераза осуществляет гидролиз эфиров холестерола; затем холестеролоксидаза, превращает холестерол в холестенон с образованием Н₂О₂. Пероксид водорода в присутствии фенола с участием пероксидазы окисляет 4‑ аминоантипирин с образованием продукта хинонимина розово-малинового цвета. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию холестерола и определяется фотоколориметрически.

Материал исследования

Сыворотка крови.

Реактивы

1) Рабочий реактив: раствор холестеролэстеразы, холестеролоксидазы, пероксидазы, фенола, 4‑ аминоантипирина в 0, 1 М калиево-фосфатном буфере.

Стандартный раствор холестерола, 4, 65 ммоль/л.

Материал исследования

Сыворотка крови.

Проведение анализа

	Опыт, мл	Стандарт, мл
Сыворотка крови	0, 02	––
Стандартный р-р холестерола	––	0, 02
Рабочий реактив	2, 0	2, 0
	Инкубируют 20 минут при 37°С, измеряют оптическую плотность опытной и стандартной проб против воды при 540 нм (зеленый светофильтр)

Расчет

Концентрация холестерола, ммоль/л = , где

Е_оп и Е_ст оптическая плотность опытной и стандартной проб,
С_ст – концентрация стандартного раствора