Задание 2. Обнаружение бактерий группы кишечной палочки в исследуемом образце водыОбъект исследования – образец водопроводной, колодезной воды или воды из любого водоема. а) Титрационный метод. Стерильной пипеткой отбирают 1 мл исследуемого образца воды и вносят в три пробирки со стерильной средой Кода и поплавками. Термостатируют при 36º С в течение 1–2 суток, затем отмечают изменение цвета среды вследствие изменения pН (с синего до зеленого или желтого) и наличие пузырьков газа в поплавках. Эти изменения питательной среды свидетельствуют о наличии в образце воды колиформных бактерий. б) Обнаружение колиформных бактерий также можно проводить на плотной среде Эндо, внося в чашку со средой 0, 25 мл исследуемого образца воды и растирая по поверхности среды стерильным шпателем. Появление ярко-красных колоний с металлическим блеском также будет свидетельствовать о присутствии в образце колиформных бактерий. Контрольные ВОПРОСЫ 1. Какими причинами обусловлено обильное заселение вод микроорганизмами? Охарактеризуйте значение микрофлоры воды. 2. Какие группы природных вод различают по происхождению и характеру микрофлоры? 3. Какие группы микроорганизмов обитают в природных водах? Каков, в общем, качественный состав микрофлоры поверхностных вод? 4. Какое понятие используют для экологической характеристики природных вод? 5. Какие этапы включает микробиологический анализ воды? 6. Какие показатели микрофлоры характеризуют безопасность питьевой воды в эпидемическом отношении? 7. Дайте понятие показателя общего микробного числа воды, приведите его норму для водопроводной воды. 8. Какие микроорганизмы являются санитарно-показательными для питьевой воды и почему? Приведите норму их содержания в водопроводной воде. 9. Опишите методики обнаружения БГКП в пробах воды. 4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия Знакомство с методами изучения микрофлоры воздуха и санитарно-бактериологическими требованиями к воздуху закрытых помещений. Изучение количественных и качественных показателей микрофлоры воздуха закрытых помещений. Основные сведения Воздух является средой, неблагоприятной для развития микроорганизмов. В нём нет питательных веществ, отсутствует необходимая влага и губительно действует ультрафиолетовый спектр прямых солнечных лучей. Поэтому микрофлора атмосферного воздуха немногочисленна и довольно случайна. Наиболее часто в воздухе обнаруживаются споры дрожжей, конидии и обрывки мицелия грибов, споры бактерий и актиномицетов, неспоровые бактерии (чаще кокки). Видовой состав и количество микроорганизмов в воздухе зависят от микрофлоры территории, над которой находится исследуемый воздух. Бактериальная загрязнённость закрытых помещений (жилых комнат, производственных и общественных помещений и т.д.) всегда большая, особенно в зимнее время. В открытом воздухе почти нет патогенных микробов, в то время как в атмосфере жилых и общественных помещениях, больничных палатах много патогенных и условно патогенных микроорганизмов. В их числе гноеродные стафилококки, стрептококки, возбудитель туберкулеза, пневмококки, энтеробактерии и другие. Следовательно, изучение микроорганизмов воздуха чрезвычайно важно как в плане их распространения, так и для организации и проведения мероприятий, направленных на уничтожение патогенных форм. Микробиологический анализ воздуха Для определения количественного содержания и качественного состава микрофлоры воздуха проводится методами, в основу которых положены два принципа: оседание (седиментация) и засасывание (аспирация). При помощи седиментационных методов (например, метод Коха) получают общее представление о содержащихся в воздухе микроорганизмах. Эти методы не дают истинного представления о количестве микроорганизмов, с его помощью определяется всего 35–60 % микроорганизмов в воздухе. Аспирационные методы (например, метод Кротова) дают возможность довольно точно определить количество микробов в определенном объёме воздуха. Метод Кротова основан на ударно-прибивном действии струи исследуемого воздуха. Прибор Кротова имеет вид цилиндра со съёмной крышкой. Внутри корпуса смонтированы электромотор, центробежный вентилятор и диск-подставка для чашки Петри. В крышке прибора имеется диск из плексигласа с клиновидной щелью для просасывания воздуха. При вращении мотора и вентилятора происходит засасывание воздуха через клиновидную щель в крышке. Струя воздуха, проходя через клиновидную щель, с большой скоростью ударяется о влажную поверхность питательной среды в чашке Петри. В результате удара находящиеся в воздухе аэрозоли, микроорганизмы, пылевые частицы и капельки жидкости равномерно прибиваются к поверхности агара и равномерно распределяются. Количество пропускаемого воздуха можно регулировать. После выращивания колоний в термостате подчитывают их количество и делают пересчёт на 1 м3. Метод Кротова даёт довольно чёткие результаты и характеризуется высокой эффективностью улавливания микрофлоры в пылевой фазе аэрозоля. При оценке санитарного состояния воздуха закрытых помещений определяют два показателя, сравнивая их затем с существующими нормами: общее микробное число воздуха (ОМЧ), число санитарно-показательных микроорганизмов – гемолитических стафилококков и стрептококков. Гемолитические стафилококки и стрептококки являются постоянными обитателями верхних дыхательных путей человека и служат косвенным показателем загрязнения воздуха патогенными микробами, выделяющимися из организма человека при кашле, чихании, разговоре и др. Особо строгие санитарные требования предъявляются к воздуху операционных, родильных домов, больничных палат и детских учреждений. Требования к санитарно-гигиеническому состоянию воздуха отражены в таблице 4. Таблица 4 Санитарно-гигиенические показатели воздуха закрытых помещений
*Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. – М.: Медицина, 1978. Содержание лабораторной работы
|
