Жидкостная хроматография.В этом случае неподвижной фазой служит жидкость. Наиболее распространенным случаем является адсорбционный вариант жидкостной колоночной хроматографии. Пример разделения природных пигментов представлен на рис.4.
Рис.4. Хроматографическое разделение природных пигментов (флавонов и изофлавонов)
Разделение веществ по методу ТСХ происходит на «открытых» колонках, т.е. в тонком слое адсорбента, нанесенного на стеклянную пластинку. В качестве твердой фазы обычно используется силикагель, оксид алюминия, целлюлоза. Адсорбент наносят на пластину двумя способами – «сухим» и «мокрым». В первом случае получают хроматографическую пластинку с незакрепленным слоем адсорбента, во втором - с закрепленным. При «сухом» способе адсорбент насыпается на стеклянную пластинку и разравнивается специальным стальным валиком, позволяющим получить однородный ровный по всей площади пластины слой адсорбента толщиной 0,5 -1 мм. При «мокром» способе в адсорбент предварительно добавляют фиксатор (гипс, крахмал и т.п.), На поверхность пластинки наносят сорбционную массу в виде суспензии из сорбента, фиксатора и воды, выравнивают ее на поверхности пластинки. Затем сушат пластинки на воздухе при комнатной температуре при 15 - 20 мин и активируют, нагревая в сушильном шкафу или выдерживая 24 ч на воздухе при 20°С. После сушки слой адсорбента оказывается связанным с поверхностью пластинки, что значительно облегчает работу с ней.
|
