Лекция 18. Фотометрические методы в медико-биологических исследованиях

• Особенности проведения фотометрических исследований биологического объекта
• Характеристика фотометрических методов исследований
• Методы фотоабсорциометрии

· Люминесцентная фотометрия

· Рефрактометрия

 

Методы фотоабсорбциометрии основаны на известном законе Бугера—Ламберта—Бера, описываю­щем ослабление монохроматиче­ского излучения длиной волны l. при прохождении слоя поглоща­ющей среды толщиной l:

где С — концентрация поглощаю­щего вещества; e(l) — удельный показатель поглощения или молекулярный коэффициент экстинкции (по­гашения).

 

Рис. 18.1. Прохождение потока излучения через вещество

Энергия свечения при хемолюминесценции черпается из запасов химической энергии реагирующих веществ, При фотолюминесценции используется энергия внешнего источника лучистой энергии. Преимуществом последнего варианта является независимость спектра люминесценции от длины волны поглощенного излучения, что очень важно и удобно для аналитических целей (рис18.2, а).

Рис. 18.2. Спектральные характеристики поглощения (П) и люминесценции (ф) приведены на рис. 18.2,а. Зависимость выхода люминесценции от длины волны возбуждающего излучения на рис. 18.2,б.

 

Для рефрактометрического анализа обычно объект исследования переводится в жидкую фазу (чаще всего это растворы).

 

Рис. 18.3. Пример калибровочной кривой для рефрактометрического определения уровня сахара (а) и диаграмма для рефрактометрического анализа тройной системы (б)