Дом. Сначала из клеток выделяют матричные РНК, среди которых присут-Ствует мРНК, кодируемая геном, который требуется выделить. Затем в Подобранных условиях на выделенной из клетки мРНК, как на матрице, с Помощью обратной транскриптазы (ревертазы) синтезируется нить Микропроцессор C Резервуары с Нуклеотидами Резервуары с реагентами И растворителями В отходы Т Блокирующий Агент Т Т Т 3’ 5’ Б Бусинка кремния Насос Синтезирующая Колонка К коллектору G A A T А Р G С Р Р А Р А Р А Р С Р С Р G Р Рис. 4.2. Схема «генной машины» (по Д. Хопвуду, 1984). ДНК, комплиментарная мРНК (кДНК). Полученная комплиментарная ДНК (кДНК) служит матрицей для синтеза второй нити ДНК с использо- Ванием ДНК-полимеразы или ревертазы. Затравкой при этом служит олигонуклеотид, комплиментарный 3’-концу мРНК; новая цепь ДНК об- Разуется из дезоксинуклеозидтрифосфатов в присутствии ионов магния. Метод с большим успехом применен для получения в 1979 г. гена гормона Роста человека (соматотропина). Полученный тем или иным способом ген содержит информацию о Структуре белка, но сам не может ее реализовать. Поэтому нужны допол- Нительные механизмы для управления действием гена. Перенос генетической информации в клетку реципиента осуществля- ется в составе вектора. Вектор – это, как правило, кольцевая молекула ДНК, способная к самостоятельной репликации. Ген вместе с вектором
|
