Ход работы. 1. При определении влияния температуры, на предметное стекло наносят каплю спермы и накрывают ее покровным стеклом (раздавленная капля)1. При определении влияния температуры, на предметное стекло наносят каплю спермы и накрывают ее покровным стеклом (раздавленная капля). Затем под микроскопом определяют двигательную активность спермиев. После этого препарат помещают на обогревательный столик с температурой 48-50°С и наблюдают за изменением (по мере прогревания) двигательной активности половых клеток. Следующую каплю спермы охлаждают на предметном стекле, поместив его на лед (на 2 мин). Поверхность стекла, которая соприкасалась со льдом, вытирают марлей, препарат ставят на столик микроскопа и снова определяют активность спермиев. 2. Влияние осмотического давления на сперму определяют в раздавленных каплях. Для этого на одном предметном стекле готовят 4 раздавленные капли секрета половых желез. В 1-й капле наблюдают, за подвижностью спермиев при обычных условиях, ко 2-й под покровное стекло вносят 3 капли 3%-ного р-ра натрия хлорида, к 3-й добавляют 3 капли 1%-ного р-ра натрия хлорида, к 4-й под покровное стекло вносят 3 капли дистиллированной воды. Во всех препаратах под микроскопом наблюдают за изменением морфологии и двигательной активности спермиев. Результаты наблюдений анализируют и дают им объяснение. 3. При определения влияния кислотности среды на спермии готовят препараты раздавленной капли и рассматривают их под микроскопом, обращая внимание на исходную активность половых клеток. Затем под покровное стекло 1-го препарата вносят 1 каплю 2%-ного р-ра натрия гидрокарбоната, во 2-й препарат к сперме добавляют каплю 0,5%-ного р-ра соляной кислоты. В 3-й препарат на предметном стекле вокруг спермы наносят 5%-ный спиртовой р-р йода и, не накрывая покровным стеклом, рассматривают его под микроскопом. Затем во всех препаратах наблюдают за изменениями подвижности и структуры спермиев.
РАБОТА 3. ПОДСЧЕТ КОЛИЧЕСТВА СПЕРМИЕВ Цель работы. Ознакомиться с методикой подсчета количества спермиев. Объект исследования. Сперма быка, барана, хряка. Материалы и оборудование. Микроскоп, счетная камера Горяева, смеситель для эритроцитов, покровные стекла, 3%-ный р-р натрия хлорида, вата, марля. Ход работы. К счетной камере притирают покровное стекло. В смеситель для эритроцитов набирают до метки 0,5 сперму и до метки 101 разбавляют ее 3%-ным р-ром натрия хлорида. Содержимое смешивают, первые 3 капли удаляют из смесителя на ватку, а следующие вносят под покровное стекло. Камеру ставят на столик микроскопа и под большим увеличением считают спермии в пяти больших квадратах (80 малых), как и при подсчете эритроцитов. Количество спермиев определяют по формуле: Х = (Н . Р . 4000 . 1000)/80, где X - количество спермиев в 1 мл (в млрд.), Н - количество спермиев в 80 квадратах, Р - разведение, 4000 - коэффициент перевода в мм3, 1000 - коэффициент перевода в мл, 80 - число квадратиков.
|
