Исследование под микроскопом

Просматривают не менее 100 полей зрения с иммерсионным объективом в течение 5 мин. Если КУБ не обнаружены в 100 полях зрения, необходимо тщательно исследовать еще 100 новых полей зрения, в сомнительных случаях просматривают весь мазок.

Туберкулезные бактерии окрашиваются в красный цвет, все остальные элементы мокроты и бактерии - в синий. Туберку­лезные микобактерии имеют вид маленьких (1,5-6 мкм), тонких, слегка изогнутых палочек с утолщениями на концах или посередине, располагаются группа­ми, парами или поодиночке. Подсчитывают их количество, ко­торое определяет тяжесть заболевания и опасность больного для окружающих. Регистрация ре­зультатов с указанием количества обнаруженных КУБ проводит­ся следующим образом:

нет КУБ на 100 полей зрения О

1-9 КУБ на 100 полей зрения, указать число

10-99 КУБ на 100 полей зрения +

1-10 КУБ на 1 поле зрения ++

более 10 КУБ на 1 поле зрения +++

При окраске по Цилю - Нильсену могут окрашиваться в красный цвет и кислотоупорные сапрофиты, для дифференциа­ции их с микобактериями туберкулеза необходимы посев мокро­ты, применение люминесцентной микроскопии и др. Сапрофи­ты крупнее, шире и длиннее микобактерий туберкулеза и распо­лагаются на клетках плоского эпителия. После окончания про­смотра мазки обрабатывают толуолом или ксилолом для удале­ния иммерсионного масла. Мазки с обнаруженными КУБ следует хранить в течение года, затем их разбивают и закапывают во из­бежание повторного использования.

Если микобактерий выделяется мало и в обычных мазках их не находят, прибегают к методу накопления (флотации).

Метод флотации (всплывания) по Поттенджеру Свежевыделенную мокроту в количестве 10-15 мл помещают в узкогорлую бутылку (колбу). Приливают двойное количество 5 г/л раствора КОН, смесь энергично встряхивают 10-15 мин. За­тем приливают 1 мл ксилола (толуола, бензола) и около 10 мл дистиллированной воды для разжижения мокроты и снова встря­хивают 10-15 минут. Затем добавляют дистиллированную воду так, чтобы уровень жидкости поднялся до горлышка бутылки. Оставляют стоять на 40-50 мин. Образовавшийся верхний бело­ватый, сливкообразный слой снимают по каплям и наносят на предварительно подогретое до 60°С предметное стекло. Каждую последующую каплю наносят на высушенную предыдущую. Препарат фиксируют и окрашивают по Цилю - Нильсену.

Метод люминесцентной микроскопии Приниип. Туберкулезные микобактерии, окрашенные ауроми­ном, люминесцируют под влиянием ультрафиолетовых лучей в виде светящихся золотистых палочек (метод менее трудоемкий и более быстрый, чем предыдущие).

Определение лекарственной резистентности возбудителя