Коклюш - острое инфекционное заболевание, характеризующееся цикличностью течения и приступообразным спазматическим кашлем.
Цель занятия: овладеть навыком микробиологической диагностики инфекции.
Знать:
- биологию возбудителей;
- эпидемиологию заболевания;
- лабораторную диагностику.
Уметь:
- интерпретировать результаты лабораторных исследований;
- подобрать препараты для профилактики и терапии коклюша.
| Раздел
| Вопросы для изучения
|
| Таксономия
| Род Bordetella. Представители патогенные для человека: B.pertussis – возбудитель коклюша, B.parapertusuis – возбудитель паракоклюша.
|
| Биология
возбудителя
| Морфологические и тинкториальные свойства: бордетеллы – мелкие, Гр- палочки, неподвижны. Спор, капсул не образуют.
Культуральные признаки: B.pertussis нетребовательна к питательным средам. Культивируется на картофельно-глицериновом агаре с кровью (среда Бордс – Жангу) и казеиново-угольном агаре (среда КУА).
Рост медленный – 48-72 часа. Колонии мелкие, круглые, блестящие как капельки ртути.
Ферментативная активность слабая: не расщепляют белки и углеводы, не восстанавливают нитраты, образуют каталазу.
|
| Антигенная структура
| В структуре B.pertusis выделено 12 антигенов.
Основные из них:
- агглютиноген, расположен не поверхностно, не токсичен, индуцирует выработку антител, не имеющих защитного значения;
- гемагглютинин, агглютинирует эритроциты человека и животных;
- протективный – не обладает токсическими свойствами, вызывает синтез защитных антител;
- нуклеопротеин – обладает свойствами аллергена.
|
| Патогенность
| Факторы вирулентности:
Филаментозный гемагглютинин связывается с гликолипидами мембран клеток мерцательного эпителия дыхательных путей, с R3 - гликопротеиновым рецептором поверхности полиморфно-ядерных лейкоцитов и инициирует фагоцитоз Коклюшный токсин(токсин пертуссин)-S1 - субъединица пертуссина. АДФ - рибозилирует мембранный белок Gi; токе активность фагоцитов и миграцию моноцитов. S2 - субъединица пертуссина, связывается гликолипидом поверхности клеток респираторного тракта; S3 - субъединица пертуссина связывается с ганглиозидами поверхности фагоцитов.
Пили-адгезия к мерцательном у эпителию дыхательных путей Пертактин-адгезия к мерцательному эпителию дыхательных путей Аденилатциклаза - подавляет киллинг-активность фагоцитов и миграцию моноцитов.
Дерматонекротоксин - повреждает кожу и является летальным фактором для лабораторных животных. Трахеальный токсин - пептидогликановый фрагмент, разрушающий реснитчатые клетки дыхательных путей; стимулирует реализацию интерлейкина-1 (лихорадка).
Эндотоксин (липополисахарид) активирует комплемент и стимулирует выработку цитокинов.
|
| Эпидемиоло-гия, патогенез
| Болеют, в основном, дети в возрасте от трех месяцев до 5-7 лет. Источник заражения – больной или носитель.
Путь передачи – воздушно-капельный.
Патогенез: возбудитель заселяет слизистые дыхательных путей, токсическое действие компонентов его клеток приводит к раздражению нервных рецепторов, спазму мелких бронхов, голосовой щели, сосудов, судорогам скелетных мышц, постоянному раздражению дыхательного центра.
|
| Микробиоло-гическая диагностика
| Методы лабораторной диагностики:
а) бактериологический;
б) серологический;
Взятие материала для бактериологического исследования производят двумя методами:
а) методом кашлевых пластинок (открытую чашку Петри с КУА держат во время приступа кашля на расстоянии 10 см от лица ребенка в течении 8-10 кашлевых толчков);
б) носоглоточным изогнутым тампоном.
Ход бактериологического исследования при коклюше:
1 этап – первичный посев на КУА.
2 этап (через 72 часа) – учет роста, приготовление мазка из подозрительных колоний, постановка реакции агглютинации на стекле с коклюшной и паракоклюшной сыворотками, пересев на скошенный КУА для выделения чистой культуры. Выдается предварительный ответ.
При отсутствии роста отрицательный ответ выдается после повторного помещения посева в термостат на 24-48 часов, т.е. на 5 суток.
3 этап (через 5 суток от начала исследования).
Изучение чистой культуры и ее идентификация проводится с целью дифференцировки коклюшной и паракоклюшной палочки по следующим тестам:
а) изучение подвижности (подвижна B.parapertussis, неподвижна B.pertussis;
б) рост на МПА (B.pertussis не растет, B.parapertussis растет);
в) рост на среде с тирозином (B.parapertussis дает коричневый пигмент);
г) определение уреазной активности (уреазу выделяет только B. parapertussis);
д) остановка реакции агглютинации со специфической коклюшной сывороткой (реакция положительная с культурой B. pertussis).
В качестве серологических реакций используют:
а) реакцию связывания комплемента;
б) РПГА (с эритроцитами коклюшным и паракоклюшным диагностикумами);
в) РИФ (вспомните правила постановки и учета этих реакций).
У переболевших – стойкий антибактериальный иммунитет.
|
| Специфичес-кая профилактика
| Активная иммунопрофилактика коклюша проводится вакцино АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийная столбнячная вакцина) с 3 месяца (вспомните к какому классу иммунопрепаратов относится АКДС и какой иммунитет формируется).
|
| Этиотропная терапия
| Антибиотики, коклюшный иммуноглобулин.
|
Вопросы для обсуждения
1. Общая характеристика и классификация бордетелл.
2. Антигенная структура и факторы патогенности возбудителя коклюша.
3. Источник инфекции, пути передачи, патогенез заболевания.
4. Методы лабораторной диагностики:
а) бактериологический: правило взятия материала, отличия возбудителя
коклюша и паракоклюша;
б) серологический: реакции, применяемые для серологической диагностики
коклюша.
5. Препараты для специфической профилактики и лечения коклюша.
