Графическая оценка констант конкурентного ингибирования
На рис. 6.4 приведен график Лайнуивера-Берка для случая типичного конкурентного ингибирования. Начальную скорость реакции, V 0, измеряют при разных значениях концентрации S, но при фиксированной концентрации ингибитора.
Прямые, проведенные через полученные экспериментальные точки, отсекают на оси у один и тот же отрезок. Длина этого отрезка, равна величине l/ V max. Это означает, что при бесконечно большой концентрации S (1/[ S ] → 0) V max будет такой же, как и в отсутствие ингибитора. Однако длина отрезка, отсекаемого на оси х (эта величина определяет значение КM), в присутствии ингибитора уменьшается (–1/ K ′ M < –1/ KM). Следовательно, конкурентный ингибитор увеличивает кажущееся значение КM (К ′ M) для субстрата. Для простого конкурентного ингибирования длина отрезка, отсекаемого на оси х, будет равна:
Зная величину KM в отсутствие I, из этого уравнения можно определить значение KI. Значения KI, для ряда аналогов субстрата, т.е. конкурентных ингибиторов, показывают, какой из них является наиболее эффективным. Ингибиторы, характеризующиеся наименьшими величинами KI, даже при малых концентрациях могут оказывать сильное ингибирующее действие на активность фермента. Многие лекарственные препараты, широко использующиеся в клинике, действуют как конкурентные ингибиторы очень важных ферментов, функционирующих как в микробных, так и в животных клетках.
|
