Ход работы. Метод определения количества никотиновой кислоты заключается в освобождении связанных её форм кислотным гидролизом

Метод определения количества никотиновой кислоты заключается в освобождении связанных её форм кислотным гидролизом, очистке полученного гидролизата и колориметрическом определении массы в сравнении со стандартным раствором.

Навеску растительного тонкоизмельченного материала массой от 1 г до 20 г (с предполагаемым содержанием никотиновой кислоты 100-150 мкг) помещают в колбу вместимостью 250 см³ и приливают 100 см³ раствора соляной кислоты концентрации 1, 0 моль/дм³ и тщательно перемешивают. Гидролиз осуществляют на кипящей водяной бане в течение 1 ч, закрыв горло колбы воронкой.

Охлажденный гидролизат нейтрализуют щелочью с массовой долей 40 % до рН 6, 5 (проверяя индикаторной бумагой) и обрабатывают 100 см³ этилового спирта с массовой долей 96 % при перемешивании. Выпавший осадок отфильтровывают при помощи воронки Бюхнера. К прозрачному фильтрату добавляют 2 г адсорбента, например асканита, и встряхивают 3 мин. Никотиновая кислота адсорбируется на асканите. Асканит отфильтровывают на воронке Бюхнера и переносят в коническую колбу, в которой элюируют никотиновую кислоту путём встряхивания асканита с 25 см³ нормального раствора едкого натра в течение 3 мин.

Смесь переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют. Измеряют объем центрифугата мерным цилиндром, которым измеряют щелочь. Затем центрифугат переносят в стакан и приливают раствор сернокислого цинка в воде (1: 1) до получения рН 6, 5 по индикаторной бумаге. Снова фильтруют на воронке Бюхнера. Фильтрат количественно переносят в коническую колбу и окисляют при нагревании на электрической плитке, прибавляя по каплям KMnO₄ с концентрацией 1, 0 моль/дм³ до получения прозрачного раствора (обычно требуется 4-6 капель). Смесь охлаждают и центрифугируют. Центрифугат обрабатывают кристаллическим К₃РО₄ (по фенолфталеину). После чего доводят рН до 6, 5 прибавляя разбавленный раствор соляной кислоты (1: 1) и фильтруют. Для проведения цветной реакции к 5 см³испытуемой жидкости и 5 см³ раствора никотиновой кислоты, предварительно нагретых до 60-70 °С, приливают по 2 см³ раствора бромистого родана и 7 см³ спиртового раствора (1: 6) свежеперегнанного анилина. После отстаивания в течение 0, 5-1 чфильтруют через сухой складчатый фильтр и колориметрируют на фотоэлектроколориметре. В качестве контроля используют смесь (1: 1) воды и этилового спирта.

Содержание никотиновой кислоты в продукте х, мг%, рассчитывают по формуле

X =

25 × V ₁ × h ₁ × 10 × 100,

a × V × 5 × h × 1000

где 25 – количество щелочи, взятой для элюации, см³;

V ₁ – объем элюата после добавления к нему раствора цинка, см³;

V -объем элюата, замеренный цилиндром после извлече-

ния никотиновой кислоты раствором NaOH, см³;

h ₁ –оптическая плотность испытуемого раствора;

h –оптическая плотность стандартного раствора;