Ботулизм. Тяжелое токсинемическое за­болевание человека из группы энтеральных клостридиозов

Тяжелое токсинемическое за­болевание человека из группы энтеральных клостридиозов. Возникает в результате при­ема пищи, содержащей экзотоксин Clostridium (см. Клостридии) botulinum. Иногда б-нь развивается вследствие инфицирования ран этим микробом. Возбудитель имеет пал очко-видную форму размерами 0,6—1x3 — 9 мкм, подвижен (перитрих), капсулу не образует, грам+ (в старых к-рах грамвариабелен), хе-моорганотроф, строгий анаэроб. Эндоспора овальной формы, расположена субтерминаль­но, превышает диаметр бактерии-спорангия, на основании чего ее внешний вид сравнивают с теннисной ракеткой. Споры высоко резистен-тны к нагреванию, выдерживают температуру 100°С в течение 3-5 час, а также к кислой среде, высоким концентрациям солей. Вегета­тивные формы растут на специальных жид­ких и плотных средах в условиях глубокого анаэробиоза (3-10 мм рт. ст.) при 25-35°С, образуя равномерное помутнение на жидких средах и окруженные зоной гемолиза непра­вильной формы колонии на кровяном агаре. В высоком столбике сахарного агара коло­нии имеют вид пушинок или зерен чечевицы. Активно ферментируют белки (желатину, свер­нутый яичный белок, кусочки мяса) и углево­ды (глюкозу, левулезу, фруктозу, мальтозу, декстрин, адонит и др.). Возбудитель обитает в кишечнике животных, включая человека, в почве, воде. Может размножаться в органи­ческих субстратах внешней среды, особенно в пищевых продуктах, где в анаэробных усло­виях и при 22-25°С продуцирует экзотоксины 7 сероваров: А, В, С_Ь2, D, E, F, G. Токсин обладает чрезвычайно высокой ядовитостью для человека, устойчивостью к нагреванию (10-15 мин при 100°С), кислой реакции, пи­щеварительным ферментам, хорошо всасыва­ется через кишечную стенку в лимфу и кровь в неизмененной или активированной (тип Е) форме и обусловливает длительную токсинемию. Токсин связывается нервными клетка­ми и блокирует передачу импульсов через нервно-мышечные синапсы. Клиника в на­чальной стадии, до необратимой фиксации токсина, полиморфна. Специфические призна­ки обусловлены расстройством деятельности нервных ядер продолговатого мозга. Сероте­рапия более эффективна в ранние сроки бо­лезни и при использовании сыворотки против того типа, который вызвал отравление. В связи с этим, а также с возможным атипичным течением возникает необходимость лабораторного под­тверждения диагноза.

Главный метод диагностики ботулизма — установление нали­чия и типа токсина в пищевых продуктах (или сырье, из которого они изготовлены), с которыми связывают заболевание, в сыворотке и плазме крови, в рвотных массах, промывных водах желудка, испражнениях, моче. Продукты (20-30 г) растирают в ступке с 20-30 мл физ.раствора или желатино-фосфатного буфера. Суспензию продуктов, так же как и испражнения, рвот­ные массы и др. иссл. материалы центрифу­гируют, надосадочную жидкость отсасывают. Наличие токсина в таком материале и с-ке и его тип устанавливают в РН на белых мы­шах. Техника биопробы состоит в том, что каждый из типов иссл. материала (1,4 мл) смешивают с 0,6 мл поливалентной (А, В, Е) диагностической (не лечебной!) антитоксичес­кой сыворотки, инкубируют при комнатной темпера­туре 5 мин, после чего смесь в объеме 0,7—1 мл вводят в/б или в/в двум белым мышам. Двум контрольным мышам делают инъекции с такой же дозой материала, смешанного с 0,6 мл физ.раствора. Для контаминированных микро­бами проб необходим еще один контроль — прогретый при 80-90°С в течение 20 мин ма­териал, который в прежнем объеме и прежним способом вводят двум мышам. Каждый мате­риал вводят отдельным шприцем. В случае содержания в нем токсина контрольные жи­вотные погибают, как правило, через 6 —24 ч (наблюдение ведется до 4 сут.) при явлениях паралича мышц, западения мышц брюшной стенки («осиная талия»), дыхательной недо­статочности. Мыши, получившие смесь мате­риала с сывороткой, выживают. Аналогичным спо­собом устанавливают тип токсина. При нали­чии типовых антитоксических эритроцитарных диагностикумов серотип токсина лучше определять в РПГА.

Культуру возбудителя выделяют из исследуемого мате­риалов путем их посева в 4 флакона с 75-150 мл регенерированной жидкой питатель­ной среды (бульон Хоттингера, казеиново-грибной, пепсин-пептон). Два флакона прогрева­ют при 80°С 20 мин, остальные два не прогре­вают. Флаконы инкубируют в анаэростате или под слоем вазелинового масла толщиной 0,5 мл при 28° и 35°С. На 2, 4, 6 и 10-е сутки дела­ют мазки с окраской по Граму, отбирают по 10-15 мл культуральной жидкости и ставят РН с поливалентной и типовыми антитокси­ческими сыворотками, определяют биохимические свойства культуры.