Методика выполнения работы. В колбу на 100 мл внести пипеткой 20 мл раствора крахмала и 8 мл буферных растворов для создания определенного значения рНВ колбу на 100 мл внести пипеткой 20 мл раствора крахмала и 8 мл буферных растворов для создания определенного значения рН. Количество вносимых буферов приведено в таблице 11.
Таблица 11. Количество вносимых буферов
Смесь крахмала с буфером поместить на водяную баню и нагревать при температуре 30о, 40о, 50о в течение 5 – 8 минут. Затем в колбу (не вынимая из бани) добавить 2 мл солодовой вытяжки или раствора фермента. Перемешать. Записать время внесения фермента (начало гидролиза). Через 10, 20, 30, 45 минут отобрать по 1 мл гидролизной смеси, внести ее в пробирку с 5 мл йодного раствора, встряхнуть. Когда проба гидролизата дает винно-красную окраску с йодным раствором, гидролиз закончен. Декстринирующую активность (А, ед/г) определяют по формуле: А = 0,4 – навеска крахмала в 20 мл раствора; 60 – перевод минут в часы;
Пример расчета. В качестве источника фермента α-амилазы был использован солод. Для экстракции была взята навеска 4 г и добавлено 100 мл дистиллированной воды, что соответствует содержанию солода в 1 мл экстракта 0,04 г. Объем экстракта для гидролиза крахмала составил 2 мл. время окончания гидролиза – 20 мин. Следовательно декстринирующая активность солода равна:
|
; где
- объем раствора фермента или экстракта, взятый для гидролиза, мл;
- время декстринизации, мин;
- содержание фермента или солода в 1 мл раствора или экстракта, г.
