Распределительная хроматография. характеризуется тем, что обе фазы жидкие и представляют собой несмешивающиеся или частично смешивающиеся жидкости

характеризуется тем, что обе фазы жидкие и представляют собой несмешивающиеся или частично смешивающиеся жидкости. В качестве неподвижной фазы служит вода хроматографической бумаги или сорбента. В качестве подвижной применяют органические растворители: фенол, креозолы, смесь бутилового спирта с уксусной кислотой и прочее.

 

Бумажная хроматография подразделяется на

 

одномерную Одномерная заключается в том, что на полоску хроматографической бумаги наносят исследовательский раствор на расстоянии нескольких сантиметров от верхнего края бумаги, которую погружают в растворитель (хроматограмма нисходящая, или использованный раствор наносят на нижний край бумаги, а верхний конец закрепляют (хроматограмма восходящая).

двухмерную получают путем последовательного пропускания через хроматографическую бумагу двух различных растворителей в двух взамноперпендикулярных направлениях. Подбирают такие два растворителя, которые давали бы наиболее сильно различающиеся коэффициентные распределения

круговую используют круглые фильтры, на которых растворитель продвигается от середины к краям. Для этого из фильтра вырезают узкую полоску по радиусу и загибают ее вниз, помещая в растворитель и наносят на середину фильтра смесь веществ. Растворитель засасывается вверх и на круглом фильтре образуются концентрические круги отдельных веществ.

 

Для стандартизации результатов одновременно хроматографируют контрольную смесь или окрашенные вещества с известными коэффициентными распределениями R (f).

Как только растворитель достигает намеченного рубежа, лист извлекают из камеры, отмечают положение фронта растворителя и высушивают.

Положение веществ выявляют обычно по окрашенным продуктам, которые образуются под действием специфических реагентов или при облучении УФ светом, если вещества несут радиоактивную метку, то при помощи счетчиков импульсов.

Положение пятна, получаемого в результате распределения испытуемого вещества, выражены коэффициентом распределения. Он представляет собой отношение скорости движения (см) испытательного вещества к скорости движения (см) фронта растворителя на полосе бумаги за определенный промежуток времени.

Например, испытуемое вещество продвинулось от места нанесения на 20 см, за этот же промежуток времени фронт растворителя прошел 30 см, следовательно: R (f) = 20/30 = 0,66.

Из 3-х методов бумажной хроматографии круговой обладает рядом преимуществ:

-можно работать с большим числом проявителей, используя отдельные секторы, вырезанные из готовых хроматограмм;

- можно работать с большими объёмами исследуемого раствора, так как вещества разделяются на большие круги;

- вещества, распределяемые на круглых хроматограммах, можно определять количественно;

- может использоваться комбинация с колоночной хроматографией.

Одномерная хроматограмма удобна для идентификации одного или нескольких компонентов, для проверки чистоты вещества или для исследования состава несложных смесей. На такой хроматограмме вещества распределяется линейно, в виде цепочки из цветных пятен.

Двухмерную применяют для анализа сложной смеси, в состав которой входят разные вещества с одинаковым коэффициентом распределения.