К а II а м и ц и IIАктивность препарата: в 1 г чистой субстанции канамицина моносульфата колеблется от 750 до 823 мг активного начала. Для расчета возьмем величину активности, равную — 750 мкг в 1 мг. Чтобы получить исходный рабочий раствор (А), содержащий в 1 мл раствора 2000 мкг активной субстанции, следует: (А) приготовить навеску 30 мг порошковидной формы канамицина моносульфата =22,5 мг активного начала и растворить в 11,3 мл стерильной дистиллированной воды— 2 мг/мл = 2 000 кг/мл; Приготовление питательной среды: Для приготовления 200 мл питательной среды на 40 культур (40 пробирок по 5 мл) на каждое разведение препарата необходимо: В две стерильные промаркированные колбы (№ 1-30 мкг/мл, № 2 - 50 мкг/мл) стерильной пипеткой налить последовательно: - в № 1 — 197 мл среды + 3 мл раствора (А) = 30 мкг/мл; Желательно вначале налить в обе колбы расчетное количество раствора А, а затем последовательно добавить в каждую из них расчетное количество питательной среды. Тщательно перемешать содержимое круговыми движениями колбы. Содержимое каждой колбы разлить в 40 пробирок по 5 мл в каждую, начиная с колбы № 1. Пробирки поместить в наклонном положении в аппарат для свертывания, добиваясь равномерной величины косяков (примерно 8—10 см), и проводить процедуру свертывания питательной среды в обычном порядке. П р о т и о м а м и д (э т и о м а м и д) Оба препарата плохо растворяются в воде. Активность препарата: в 1 г чистой субстанции — 990 мг активного начала. Препарат нерастворим в дистиллированной воде. (А) приготовить навеску препарата весом 20 мг вещества, и растворить в 3 мл ректифицированного этилового спирта 96° или диметил-сульфоксида. Добавить к раствору 6,9 мл стерильной дистиллированной воды —2 000 мкг/мл; Приготовление питательной среды: Для приготовления 200 мл питательной среды на 40 культур (5мл х 40) на каждое разведение препарата необходимо: В две стерильные промаркированные колбы (№ 1 «30 мкг/мл», № 2 «50 мкг/мл») стерильной пипеткой налить последовательно: - в № 1 — 197 мл среды + 3 мл раствора (А) — 30 мкг/мл; - в № 2 — 195 мл среды + 5 мл раствора (А) — 50 мкг/мл. раствора А, а затем последовательно добавить в каждую из них расчетное количество питательной среды. Тщательно перемешать содержимое круговыми движениями колбы. Содержимое каждой колбы разлить в 40 пробирок по 5 мл в каждую, начиная с колбы №1. Пробирки поместить аппарат для свертывания и проводить процедуру свертывания питательной среды в обычном порядке. Капреомицин Содержание активного начала в препарате - 840 мг в 1 г. Растворы капреомицина отличаются нестабильностью, поэтому их готовят непосредственно перед приготовлением сред. Для приготовления 200 мл питательной среды на 40 культур (5мл х 40) можно воспользоваться следующей схемой: Приготовить навеску 20 мг вещества
(А) 20 мг кампреомицин + 8,4 мл НгО Колбы №1 «30 мкг/мл», №2 «50 мкг/мл»: -в№2 5мл(А)+ 195 мл среды - 50мкг/мл Желательно вначале налить в колбы расчетное количество раствора А, а затем расчетное количество питательной среды. Перемешивание, разливание и коагулирование производят как и в предыдущем случае. Циклосерим (Z) - с у с I о s e r / и) В 1 г препарата 980 мг активного начала. Растворы циклосерина отличаются нестабильностью, поэтому их готовят непосредственно перед приготовлением сред. (А) приготовить навеску препарата весом 20 мг вещества, и растворить в 9,9 мл стерильной дистиллированной воды — 2 мг/мл = 2 000 мкг/мл; Приготовление питательной среды: Для приготовления 200 мл питательной среды на 40 культур (5мл х 40) на каждое разведение препарата необходимо: В две стерильные промаркированные колбы (№ 1— 30 мкг/мл, № 2— 50 мкг/мл) стерильной пипеткой налить последовательно: - в № 1 — 197 мл среды + 3 мл раствора (А) — 30 мкг/мл; - в № 2 — 195 мл среды + 5 мл раствора (А) — 50 мкг/мл. раствора А, а затем расчетное количество питательной среды. Перемешивание, разливание и коагулирование производят как и в предыдущем случае. ПАСК Активность препарата: в 1 г чистой субстанции — 877,2 мг активного начала. Для примера расчета возьмем среднюю величину активности, равную — 880 мг в 1 мг Чтобы получить исходный рабочий раствор (А), содержащий в 1 мл раствора 1,0 мг активной субстанции, следует: (А) взвесить на электронных или аналитических весах 20 мг порошковидной формы ПАСК = 17,6 мг активного начала и растворить в 17,6 мл стерильной дистиллированной воды — 1 мг/мл =1 000 мкг/мл; (Б) к 18 мл стерильной дистиллированной воды добавить 2 мл раствора А — 100 мкг/мл; Приготовление питательной среды: Для приготовления 200 мл питательной среды на 40 культур (40 пробирок по 5 мл) на каждое разведение препарата необходимо: В две стерильные промаркированные колбы (№ 1 «1 мкг/мл», № 2 «5 мкг/мл») стерильной пипеткой налить последовательно: - в № 1 — 198 мл среды + 2 мл раствора (Б) — 1 мкг/мл; - в № 2 — 190 мл среды + 10 мл раствора (Б) — 5 мкг/мл. Желательно вначале налить в обе колбы расчетное количество раствора Б, а затем последовательно добавить в каждую из них расчетное количество питательной среды. Тщательно перемешать содержимое круговыми движениями колбы. Содержимое каждой колбы разлить в 40 пробирок по 5 мл в каждую, начиная с колбы №1. Пробирки поместить в аппарат для свертывания и проводить процедуру свертывания питательной среды в обычном порядке. О ф л о к с а ц и II Активность препарата: в 1 г чистой субстанции —1000 мг активного начала. Офлоксацин не растворим в дистиллированной воде, для его растворения применяется 0,1 N раствор NaOH. Для этого: к навеске 0,4 г NaOH добавить 100 мл стерильной дистиллированной воды = 0,1N NaOH. (А) приготовить навеску препарата весом 20 мг вещества и растворить ее в 20 мл 0,1 N раствора NaOH — 1 мг/мл = 1 000 мкг/мл; (Б) к 12 мл стерильной дистиллированной воды добавить 3 мл раствора (А) — 200 мкг/мл; Приготовление питательной среды: Для приготовления 200 мл питательной среды на 40 культур (5мл х 40) на каждое разведение препарата необходимо: В две стерильные промаркированные колбы (№ 1 «2 мкг/мл», № 2 «10 мкг/мл») стерильной пипеткой налить последовательно: - в № 1 — 198 мл среды + 2 мл раствора (Б) = 2 мкг/мл; - в № 2 — 190 мл среды + 10 мл раствора (Б) =10 мкг/мл. раствора Б, а затем последовательно добавить в каждую из них расчетное количество питательной среды. Тщательно перемешать содержимое круговыми движениями колбы. Содержимое каждой колбы разлить в 40 пробирок по 5 мл в каждую, начиная с колбы №1. Пробирки поместить аппарат для свертывания и проводить процедуру свертывания питательной среды в обычном порядке.
|
