Метод внутрішнього стандарту

Метод внутрішнього стандарту використовується у тих випадках, коли неможливо зафіксувати піки всіх компонентів при допомозі хроматографа (наприклад, коли використовується селективний детектор) або немає необхідності визначати концентрації всіх компонентів суміші. Метод дає правильні результати навіть при аналізі проб, які випаровуються тільки частково.

Цей метод передбачає додавання до визначеної кількості g_сум аналізованої суміші відомої кількості g_ст внутрішнього стандарту (мітки) – речовини, яка не міститься в досліджуваному зразку. В якості внутрішнього стандарту вибирають речовину, близьку за фізико-хімічними властивостями (структура, леткість) до компонентів суміші, абсолютно інертну, добре змішувану з пробою, без домішок (максимум 1-2%). Після хроматографування вимірюють параметри піків аналізованого компоненту і стандартної речовини.

Принцип методу полягає у співставленні деякого параметру хроматографічного піку Р_х (площі, висоти піку чи добутку висоти на час утримання) визначуваного компоненту з аналогічним параметром Р_ст. іншої сполуки (мітки), яка додається у відомій кількості до проби.

Концентрацію компонентів в аналізованій пробі знаходять за формулою:

,

де P_i^x, P^x_ст – виміряні кількісні параметри хроматографічних піків і -того компоненту і стандартної речовини;

k_i – калібрувальний множник для визначуваної сполуки відносно речовини внутрішнього стандарту;

g^x_ст, g^x_сум – маси стандартної речовини та аналізованої проби, зважені і змішані перед виконанням аналізу.

Метод внутрішнього стандарту має переваги перед двома попередніми, тому що при його використанні немає необхідності у визначенні повного складу суміші і результати аналізу не залежать від величини проби. Але він потребує виконання допоміжних операцій з підбору і додавання стандартної речовини.

Порядок виконання аналізу. В окремій посудині готують калібрувальну суміш, яка складається з окремого компонента досліджуваної суміші і речовини-стандарту. 2-3 мкл цієї суміші тричі вводять в хроматограф і фіксують її хроматограми. Калібрувальну суміш готують для кожного компонента досліджуваної суміші. Результати вимірювань записують у таблицю.

Калібрувальна суміш	Досліджувана суміш
gст		gxст
gі		gxсум
Pi		Pix
Pст		Pxст