Желудочном соке с последующей микроскопией осадка
Индивидуальный метод. Метод основан на переваривании в специаль- ной жидкости образцов мышечной ткани, взятых из ножек диафрагмы и обна- ружении в осадке (переваренной массе) личинок трихинелл. Навеску (массу навески определяют согласно данным, приведенных в таблице 1) измельчают в мясорубке с диаметром решетки 3 - 4 мм, а затем пе- реносят в коническую колбу соответствующей вместимости и заливают искус- ственным желудочным соком в соотношении 1:15. Колбу помещают в термо- стат при температуре 41 - 42°С и выдерживают 5 - 7 часов, периодически пере- мешивая. За 10 минут до окончания переваривания перемешивание прекраща- ют. После окончания переваривания в осадке остаются хлопья коричневого или темно-коричневого цвета. Из колбы осторожно сливают 2/3 надосадочной жидкости, осадок выли- вают на капроновое сито (полусферической формы с диаметром ячеек 400 мкм), установленное в стеклянной воронке диаметром 90 - 120 мм, соединенной резиновой трубкой с пробиркой вместимостью 5 см3. Залитый осадок отстаивают 15-20 минут, а затем резиновую трубку пере- крывают зажимом и пробирку отсоединяют. Содержимое пробирки (осадок) переносят по частям на часовое стекло и исследуют под малым (8х10) увеличе- нием микроскопа или трихинеллоскопа на наличие личинок трихинелл. Если конкременты образовались в результате обызвествления личинок трихинелл, то последних обнаруживают в осадке в виде белых червячков. При наличии в мясе обызвествленных саркоцист в осадке находят споры. Групповой метод. Метод группового исследования свинины на трихи- неллез основан на растворении в переваривающей жидкости образцов мышеч- ной ткани и обнаружении в осадке личинок трихинелл. Растворение проб мышечной ткани осуществляют при помощи аппаратов для выделения личинок трихинелл АВТ или АВТ-У, которые представляют со- бой термостатирующую камеру с вмонтированными в нее тремя (аппарат АВЕ- У) или восьмью (аппарат АВТ) реакторами, предназначенными для растворе- ния мышечной ткани в переваривающей жидкости. Реакторы имеют мешалку с индивидуальным привесом от электродвигателя и отстойник для сбора осадка. Для трихинеллоскопии из ножек диафрагмы каждой свиной туши (на границе перехода мышечной ткани в сухожилие) отбирают пробу мышц массой 1 г по 0,5 г от каждой из ножек диафрагмы. В групповую пробу массой до 100 г входит до 100 проб, взятых от свиных туш. В зависимости от эпидемиолого- эпизоотической зоны, величина пробы для переваривания может быть увеличе- на с 1 до 4 г (таблица 5).
Групповую пробу измельчают на мясорубке с механическим или элек- трическим приводами Полученный фарш помещают в стакан, маркированный цифрой, соответствующей номеру реактора. Термостатирующую камеру через патрубок в нижней части стойки аппа- рата соединяют с сетью горячего водоснабжения и заполняют теплой (40-42 0С) водой до ее вытекания через патрубок в днище камеры. После этого аппарат подключают к электросети. Для получениям переваривающей жидкости в каждый из реакторов зали- вают до метки теплую воду (40-420 С), а затем вносят 5 г пищевого пепсина ак- тивностью 100000 ЕД и 25 мл концентрированной соляной кислоты. Для пере- мешивания смеси включают мешалку на 1 мин. В реактор с переваривающей жидкостью через заправочный бункер вно- сят измельченную групповую пробу, включают двигатель мешалки и заводят таймер поворотом рукоятки вправо до отметки 20 минут. Окончание перевари- вания пробы определяют по звуковому сигналу таймера, после чего отключают двигатель и вновь заводят таймер до отметки 10 минут - времени, необходимо- го для отстаивания жидкости. После звукового сигнала таймера осторожно открывают зажим отстойни- ка и лунку кювета (емкостью 2 мл) заполняют осадком, образовавшимся на дне отстойника. Кювет маркирован цифрой, соответствующей номеру реактора. За- тем закрывают зажим отстойника и осадок, собранный в кювете, подвергают исследованию на наличие личинок трихинелл. Исследование осадка производят при помощи проекционного трихинел- лоскопа, бинокулярной лупы или микроскопа. При выявлении в осадке хотя бы одной личинки трихинелл соответству- ющую исследованную группу свиных туш переводят на запасной подвесной путь, разделяют на подгруппы по 10-12 туш и каждую из них подвергают инди- видуальной трихинеллоскопии. Туши из подгруппы, давшей положительный результат при повторной трихинеллоскопии, исследуют индивидуально компрессорным методом для выявления туши, пораженной личинками трихинелл. С трихинеллезными тушами поступают в соответствии с действующими «Правилами ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно- санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов». Однократно использованную переваривающую жидкость применяют для исследования еще двух групповых проб свинины, если результаты исследова- ний первой, а затем второй групповой пробы были отрицательными. При поло- жительном результате исследования повторное использование переваривающей жидкости не допускается. Отработанную переваривающую жидкость сливают в ванну, а затем в канализацию. Результаты трихинеллоскопии свиных туш групповым методом реги- стрируют в журнале установленной формы. Групповой метод трихинеллоскопии свинины целесообразно применять в зонах, благополучных по трихинеллезу.
|
