Изолирование этиленгликоля из биологических жидкостей (метод Гуляевой).

К 10 мл крови прибавляют 15 мл ацетона, смесь тщательно перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют в течение 20 мин при 3000 об./мин. Выделившийся водно-ацетоновый слой декантируют в стаканчик, куда прибавляют 0,5 г активированного угля. Взвесь фильтруют в выпарительную чашку, при этом фильтр промывают несколькими порциями ацетона, которые присоединяют к основному фильтру. Затем фильтрат выпаривают под вентилятором в потоке горячего воздуха (температура 60 °С) до исчезновения запаха ацетона. Полученное водное извлечение переносят в мерную пробирку, и после измерения объема (1,0—1,5 мл) исследуют хроматографическими методом.

К 10 — 50 мл мочи прибавляют активированный уголь из расчета 0,2 г на 10 мл объекта, полученную взвесь фильтруют через увлажненный фильтр в выпарительную чашку, фильтр промывают несколькими порциями воды очищенной (или ацетона - при необходимости проведения исследования на этилкарбитол, диэтиленгликоль), которые присоединяют к основному фильтрату. Фильтрат выпаривают на кипящей водяной бане приблизительно до 1,0—1,5 мл. К остатку прибавляют 15 мл ацетона и 10—15 г безводного натрия сульфата. Полученную смесь тщательно растирают пестиком и оставляют на 30 мин при периодическом перемешивании. Затем ацетоновое извлечение сливают с осадка и фильтруют в выпарительную чашку, а остаток вновь дважды экстрагируют ацетоном. К объединенному ацетоновому извлечению прибавляют приблизительно 2 мл воды очищенной, и ацетон испаряют в токе горячего воздуха до исчезновения его запаха. Полученное водное извлечение переносят в мерную пробирку, и после измерения объема (1,0—2,0 мл), исследуют.

Изолирование этиленгликоля из внутренних органов (метод Гуляевой)

К 20 г мелко измельченной ткани печени, почки или стенки мочевого пузыря, смесь тщательно перемешивают, прибавляют 20 мл ацетона и настаивают в течение 30 мин. Затем ацетоновое извлечение сливают с объекта исследования, а последний вновь настаивают 30 мин. с новой порцией ацетона (20 мл). Водно-ацетоновые извлечения фильтруют в стаканчик, куда прибавляют 0,5 г активированного угля. Взвесь фильтруют в выпарительную чашку, при этом фильтр промывают несколькими порциями ацетона, которые присоединяют к основному фильтрату, затем фильтрат выпаривают приблизительно до объема 1,0 - 1,5 мл. К остатку прибавляют 15 мл ацетона и, после перемешивания, 10 - 15 г безводного натрия сульфата. Далее поступают как при изолировании этиленгликоля из биологических жидкостей.

 

Качественный анализ дистиллята на содержание этиленгликоля.

 

1. Реакция окисления этиленгликоля до формальдегида.

К 3 - 5 мл дистиллята прибавляют 5 капель 12 % раствора кислоты серной, 5 капель 5 % раствора калия перйодата в 5 % растворе кислоты серной и взбалтывают. Через 5 мин. прибавляют 3 - 5 капель раствора кислоты серной, а затем 4 капли раствора кислоты фуксинсернистой. При наличии этиленгликоля через 3 - 20 мин появляется красно-фиолетовое или розовое окрашивание.

2. Реакция окисления этиленгликоля до щавелевой кислоты.

Часть дистиллята смешивают с концентрированной азотной кислотой и выпаривают досуха. В остатке образуется щавелевая кислота, образующая оксалат кальция при добавлении его солей.

При рассмотрении под микроскопом кристаллы оксалата кальция имеют характерную форму, напоминающую почтовые конверты.

3. Реакция образования гликолята меди.

К части анализируемого дистиллята добавляют избыток раствора гидроксида натрия и по каплям раствор сульфата меди – образуется гидроксид меди, который растворяется в присутствии этиленгликоля с образованием раствора, окрашенного в синий цвет.

 

Реакция образования гликолята меди может быть использована для определения этиленгликоля в технических жидкостях (антифризах, тормозных жидкостях).

Еще одним испытанием для определения этиленгликоля в технических жидкостях является его окисление до щавелевой кислоты и дальнейшее определение по реакциям:

- образования оксалата кальция;

- часть остатка смешивается с концентрированной серной кислотой и нагревается – выделяется оксид углероды (II), горящий голубым пламенем. Реакция возможна при получении достаточного количества щавелевой кислоты;

- часть остатка растворяется в воде, подкисляется серной кислотой и добавляется раствор перманганата калия. При нагревании раствор должен обесцвечиваться.

Количественное определение этиленгликоля в диализате проводят методом газожидкостной хроматографии или фотоколориметрическим методом (основа на реакции окисления этиленгликоля до формальдегида, с последующим взаимодействием с фуксинсернистой кислотой).