Количественный анализ кооперативностиРассмотрим случай полностью кооперативного связывания. Пусть молекула фермента имеет n связывающих центров и лиганд присоединяется одновременно ко всем центрам. E + nS <=> ESn (9.6) Константа диссоциации имеет следующий вид: Степень насыщения Y есть Тогда
Аналогичное уравнению (9.9) уравнением Хилла
Рис. 9.4. График Хилла для связывания кислорода с нормальным гемоглобином (рН 7,4) Величина h, определяемая из наклона кривой в области полунасыщения (У=0,5) известна под названием коэффициента Хилла и является мерой кооперативности. При h = 1 кооперативность отсутствует, h > 1 - положительная кооперативность, h < 1 - отрицательная. Максимальное значение h равно числу центров связывания. Физиологическое значение кооперативного связывания состоит не в увеличении сродства лиганда к ферменту, а в том, что положительная кооперативность обеспечивает резкое изменение степени сродства в очень узком диапазоне концентраций лиганда или, иными словами, в повышении чувствительности скорости ферментативной реакции к варьированию концентрации метаболита. Уравнение Хилла можно использовать при кинетических экспериментах, если вместо У подставить v
|
(9.7)
(9.8)
(9.9)
(9.10)
